Počet záznamů: 1
Příprava transgenních rostlin Secale cereale se samčí sterilitou
Údaje o názvu Příprava transgenních rostlin Secale cereale se samčí sterilitou [rukopis] / Aneta Wandrolová Další variantní názvy Příprava transgenních rostlin Secale cereale se samčí sterilitou Osobní jméno Wandrolová, Aneta (autor diplomové práce nebo disertace) Překl.náz Preparation of transgenic plants Secale cereale with male sterility Vyd.údaje 2013 Fyz.popis 83 Poznámka Ved. práce Petr Galuszka Oponent Hana Pospíšilová Dal.odpovědnost Galuszka, Petr (vedoucí diplomové práce nebo disertace) Pospíšilová, Hana (oponent) Dal.odpovědnost Univerzita Palackého. Katedra biochemie (udelovatel akademické hodnosti) Klíč.slova Biolistika * Secale cereale L. * barnasa * samčí sterilita * tapetum * Biolistics * Secale cereale L. * male sterility * barnase * tapetum Forma, žánr diplomové práce master's theses MDT (043)378.2 Země vyd. Česko Jazyk dok. čeština Druh dok. PUBLIKAČNÍ ČINNOST Titul Mgr. Studijní program Navazující Studijní program Biochemie Studijní obor Biochemie kniha
Kvalifikační práce Staženo Velikost datum zpřístupnění 00179534-811146788.pdf 25 3.9 MB 02.05.2013 Posudek Typ posudku 00179534-ved-827172691.pdf Posudek vedoucího 00179534-opon-477613075.pdf Posudek oponenta Signatura Čár.kód Lokace Dislokace Info DP-KBC/212 (PřF-KBO) 3134515464 PřF-Holice PřF, Knihovna Holice - sklad pouze prezenčně
Cílem diplomové práce bylo připravit transgenní rostliny žita se samčí sterilitou. Standardně vyšlechtěné sterilní rostliny žita jsou používané pro produkci heterózního osiva a také jednou z podmínek pro produkci námele. Nezralé embrya žita byla transformována biolistickou metodou. Pro transformaci byly použity dva plasmidy pAHC25: PE1-barnase-nos a pAHC25: TA27-barnase-nos. Oba obsahovaly gen pro barnasu pod tapetově specifickým promotorem (PE1 ? rýže, TA27 ? tabák) a gen selekce na herbicid fosfinotricin. Běhen několika stovek transformací finálně zregenerovalo více než dvě stě rostlin žita a přes deset rostlin ječmene. Po analýze regenerovaných rostlin molekulárně biologickými metodami bylo zjištěno, že získané rostliny nebyly transgenní. Nicméně, byla zavedena metoda transformace a optimalizovány podmínky regenerace rostlin z embryonálních kalusů. Negativní výsledek experimentů ukázal, že k dosažení vytyčeného cíle bude třeba zvolit jinou metodu transformace či jiný plasmid s aditivní selekcí na antibiotikum.The aim of the present study was to prepare transgenic rye plants with male sterility. Classically bred sterile rye hybrids are used for production of heterosis seeds and as a major component for field production of ergot. Immature embryos of rye were transformed by biolistic method using gene gun. Two plasmids pAHC25: PE1-barnase-nos and pAHC25: TA27-barnase-nos were used for transformation. Both plasmids contain gene for barnase under the control of tapetum specific promotors (PE1 from rice, TA27 from tobacco) and phosphinotricin resistance gene. After hundreds of transformation events, approximately two hundreds of rye plants and more than ten barley plants regenerated. Analysis of these regenerants by molecular biology methods revealed that obtained plants were not transgenic. Nevertheless, new method for transformation was introduced to the laboratory and conditions for in vitro rye plants regeneration from embryonic calli were optimized. Negative result of experiments indicates that other method of transformation with additive selection against antibiotics has to be used to achieve planned aim.
Počet záznamů: 1