Tato bakalářská práce je zaměřena na analýzu sacharidů pomoci systému HPLC-ELSD a určení množství laktosy v reálném vzorku mléka za zjištěných optimalizovaných podmínek nastavení přístrojového vybavení a příslušného detektoru. Teoretická část se především zaobírá sacharidy, jejich výskytu, struktuře, složení a rozdělení. Je zde věnována kapitola také nanočásticím, enzymu laktase, který štěpí vazby v laktose. Mimo jiné teoretická část obsahuje popis metody, která slouží k separaci a detekci sacharidů - HPLC-ELSD. Experimentální část je věnována nalezení optimálních podmínek pro separaci a detekci laktosy, galaktosy a glukosy v reálném vzorku mléka a stanovení operační stability enzymu laktasy imobilizovaného na mikročásticích chitosanu se zabudovanými magnetickými jádry.This bachelor thesis is focused on analysis of a carbohydrates by HPLC-ELSD and lactose determination in milk under optimalized conditions. A theoritical part deals with saccharides, their occcurrence, structure, composition and distribution. In addition, there is a chapter devoted to lactase, which cleaves lactose bonds and nanoparticles. Moreover, the theoretical part contains description of the method used for the separation and detection of carbohydrates - HPLC-ELSD. The experimental part consists of the method development and optimization of ELSD detector settings, lactose determination and assesment of operation stability of the enzyme lactase immobilized on chitosan microparticles with built-in magnetic core.