Tato práce se zabývá vývojem a optimalizací nástroje pro studium metabolismu purinových a pyrimidinových nukleosidů v rostlinných pletivech. Teoretická část je věnována rešerši na téma metabolismu těchto látek v rostlinách a různým metodám jejich stanovení. V experimentální části jsme vyvinuli metodu stanovení purinů a pyrimidinů metodou UHPLC-MS/MS včetně izolace těchto látek z rostlinného extraktu pomocí SPE na směsném anexu. Touto metodou jsme následně kvantifikovali purinové a pyrimidinové báze a nukleosidy v buňkách ?wild type? a mutantů nukleosidas ze suspenzní kultury Physcomitrella patens. Zjistili jsme, že v P. patens je nejdůležitější nukleosidasou PpNSH1, která efektivně hydrolyzuje jak purinové, tak i pyrimidinové nukleosidy.The thesis deals with development and optimization of the method for purine and pyrimidine bases and their nucleosides quantification in plant tissues. The theoretical part summarizes the current knowledge of plant metabolism and up-to-date quantification methods of these compounds. In the experimental part, we have developed a pre-LC SPE purification and a novel UHPLC-MS/MS quantification method for plant purines and pyrimidines. Afterwards we have applied the method for quantification of these compounds in the cells of wild-type and nucleosidase mutants Physcomitrella patens. Based on the quantification, it has been revealed, that PpNSH1 is the most important nucleosidase in P. patens, that effectively hydrolyses both purine and pyrimidine nucleosides.